1、纯芝麻油呈淡红色或红中带黄，小磨芝麻油颜色稍深，为棕红色透明油状液体。如果芝麻油中掺入了其他食用植物油脂，则色泽发生变化：掺入菜子油呈深黄色，掺入棉子油呈黑红色，掺入精炼棉子油呈黄色。如芝麻油中掺入米汤（上清液）类物质，则浑浊、模糊不清并有沉淀物，且容易变质。
2、在阳光下看纯芝麻油，清晰透明。掺入1.5%的凉水，在光照下呈不透明液体状；掺入3.5%的凉水，芝麻油会自动分层，沉淀变质；掺入猪油，加热后会发白；掺入菜子油，则颜色发青；掺入棉子油，加热会粘锅；掺入冬瓜汤、米汤，会变浑浊，半小时后还会有沉淀。
3、用筷子蘸1滴芝麻油，轻轻滴在平静的水面上（可用碗、盘或小盆盛清水）。纯芝麻油会呈现出无色透明的、薄薄的大油花，并有浓重的芝麻油味，而掺假的芝麻油会出现较厚的小油花，油花持续时间短，香味淡薄，并伴有其他油脂的异味。
4、将芝麻油试样放在-10℃冰箱内冷冻观察。纯芝麻油在此温度下仍为液体，掺假的芝麻油在此温度下开始凝固。
5、将少许芝麻油倒入试管中，用力振荡后观察。纯正芝麻油振荡后不起泡或只起少量泡沫，而且很快消失；掺入花生油振荡后泡沫多，消失慢，泡沫呈白色；掺入精炼棉子油振荡后泡沫多，不易消失，用手掌蘸油摩擦，可闻到碱味；掺入大豆油振荡后出现淡黄色泡沫且不容易消失，用手掌蘸油摩擦，可闻到豆腥味；掺入菜子油振荡后出现的泡沫消失慢，用手掌蘸油摩擦，可闻到辛辣味。
6、将油样滴于手心，用另一只手掌用力摩擦，由于摩擦产热，油内芳香物质分子运动加速，香味容易扩散。如为芝麻油，会有单纯浓重的芝麻油香味。如掺入菜子油，会夹杂有菜子油的异味；如掺入棉子油，则摩擦后油的香味淡薄或不明显。此法简便易行，可靠性较强[52石斛网www.52shihu.com]，适用于现场鉴别。
7、用油提子盛满香油，从高处向原缸中倾倒，纯香油油花呈金黄色，且很快消失，若油花呈淡黄色，说明混有菜籽油。