雌蛛纺丝形成一个卵袋，内装受精卵，卵袋附在网上（结网蜘蛛），或产在石下、叶面上。有的母蛛守护卵袋，也有随身携带卵袋的。孵出卵壳的幼蛛仍在卵袋内停留数天，并在袋内脱1～2次皮。幼蛛在成熟前共脱皮4～10次。蛛丝在蜘蛛的生活中起重要作用。结网是许多种蜘蛛的一种本能。网有多种类型，结网方法也不尽相同。许多种蜘蛛，尤其是幼蛛，能利用丝飞航。
蜘蛛卵生，卵一般包于丝质的卵袋内，雌体保护和携带卵袋的方式不一，或置网上，石下，树枝上，或用口衔卵袋，胸抱卵袋等。为不完全变态，在胚胎时期腹部仍分节，营结网或不结网生活。网有圆网，皿网，漏斗网，三角网，不规则网等。有一首民谣"小小诸葛亮，独坐中军帐，摆下八卦阵，专捉飞来将"，把蜘蛛布网捕虫的现象描绘的维妙维肖。
蜘蛛在内部构造上较特殊的是呼吸器官的书肺，书肺内部为一囊状，每一囊的囊壁向内突入许多叶状褶皱，如同书页一样。蜘蛛毒腺为圆筒状，腺壁由一层细胞构成，毒腺的前方有导管，在螯爪的前端附近开口，毒腺分泌出毒液，对小动物有致死效果，有的对人也能危及生命，如被红斑毒蛛或穴居狼蛛螯咬后，必须及时治疗，以免危及生命。
蜘蛛为食肉性动物，其食物大多数为昆虫或其他节肢动物，但口无上颚，不直接吞食固定食物。当用网捕获食饵后，先以螯肢内的毒腺分泌毒液注入捕获物体内将其杀死，由中肠分泌的消化酶灌注在被螯肢撕碎的捕获物的组织中，很快将其分解为液汁，然后吸进消化道内。
消化道分为前肠、中肠及后肠三部分。前肠包括口、咽、食道及吸吮胃，管状的咽及吸吮胃都可把液体食物吸进消化道并运至中肠。中肠包括中央的中肠管及两侧的盲囊。中肠之后为后肠，是排泄物汇集的地方。
排泄器官的一对起源于内胚层的马氏管。除马氏管外，幼蛛还有一对基节腺进行排泄。但成蛛的基节腺多退化，没有排泄作用。
蜘蛛的生活方式可分为两大类。即游猎型和定居型。游猎型者，到处游猎、捕食、居无定所、完全不结网、不挖洞、不造巢的蜘蛛。有鳞毛蛛科，拟熊蛛科和大多数的狼蛛科等。定居型的：有的结网，有的挖穴，有的筑巢，作为固定住所。如壁钱、类石蛛等。蜘蛛似乎懂礼貌，凡营独立生活者，个体之间都保持一定间隔距离，互不侵犯。
蜘蛛不但雌雄异形，雄小于雌，而且有的异色，如跳蛛科的雄性体色明亮，雌性体色晦暗，巨蟹蛛科的雄性背面有红色斑纹，雌性全为绿色。
雄性蛛比雌性蛛的性成熟时间早，雄性蛛出现的时间短，一般采集到的大多是雌性蛛，蜘蛛的交尾方式独特，如交尾后，雄性不被雌蛛杀死而能逃脱者则能再次交尾。
雌性蛛产卵前，先用丝做"产褥"。产卵其上，然后又用丝覆盖。并将卵袋编成固定形式。一个雌性蛛，一般只产一个卵袋，也有产多个卵袋的，如园蛛产5～6个，红斑毒蛛产13个，一个雌性蛛的产卵数可以从几个到几百个，如红斑毒蛛可产60～720个，园蛛科的某些种可产1000个。
从卵壳孵出的幼蛛仍旧留在卵袋内，要在卵袋内经1次蜕皮后，才离开卵袋。由于狼蛛不仅带卵袋游猎，而且当幼蛛孵化后，还有携幼的习性，故称狼蛛为褓姆蛛。雌性蛛在编成卵袋后，有的即死亡，有的在幼蛛脱离卵袋后，继续生活一段时期才死亡，有的被自己孵出的幼蛛活活咬死为食。
蜘蛛至成熟期以前，随着生长，须经多次蜕皮，蜕皮次数和间隔时间，很不一致，一般说，小型蛛一生蜕皮4～5次；中型蛛约7～8次；大型蛛约11～13次，如红斑毒蛛的雄蛛蜕皮5次，雌蛛7次。
与一般昆虫相比，蜘蛛是长寿命者，大多数蜘蛛完成一个生活史，一般为8个月至2年，雄性蛛是短命的，交尾后不久即死亡。其他如水蛛和狡蛛能活18个月，穴居狼蛛能活2年，巨蟹蛛能活2年以上，还有捕鸟蛛的寿命长达20～30年。
所有的蜘蛛生活，都利用丝，丝由丝腺细胞分泌，在腺腔中为粘稠的液体，经纺管导出后，遇到空气时很快凝结成丝状，丝的比重为1.28，强韧而富有弹性。
网穴蜘蛛，白天在网内，夜晚守在洞口，伺机猎食或外出觅食。熊蛛在土块下挖一浅坑，穴居狼蛛在地下挖一垂直的深洞，舞蛛在洞口还加编了活盖。这种活盖是由多个丝层构成的。庞蛛的洞深达1米，该蛛体小，毒性强，一旦咬伤穴兔后，四分钟即死亡。
幼蛛在开始结网生活时，蛛丝如附着不到任何物体时，恰好有上升的气流，则腾空而起，在空中顺着风飘飞，如园蛛科、狼蛛科、盗蛛科、跳蛛科等，都有"飞行"本领，对避免互相残杀，疏散密度过大，很起作用。
蜘蛛为肉食性，食性广，但主要是捕食昆虫，有时能捕食到比其本身大几倍的动物，如南美的捕鸟蛛，它有时捕食小鸟、鼠类等。蜘蛛的口，仅适于吸吮液体食物。当捕获猎物时，先将毒液注猎物，麻醉或杀死猎物后，分泌消化液，经猎物伤口，注入猎物体内，先进行体外消化，待猎物的软组织被分解及液化后，吸入体内，再到体内消化和吸收。
蜘蛛的天敌很多。蟾蜍、蛙、蚊、蜥蜴、蜈蚣和鸟类都捕食蜘蛛，有的寄生蜂寄生于蜘蛛卵内，有的寄生蝇的幼虫在蜘蛛卵袋中发育，小头蚊虻昆虫几乎全部都是以幼虫的形式寄生到蜘蛛体内。蜘蛛常用多种方法来御敌，如排出毒液，隐匿，伪袋，拟态，保护色，振动等等。当逃不掉时，而自己的附肢被敌害夹持时，干脆切断自己的附肢一走了之，反正自断的步足在蜕皮时还会再生。
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